小鼠细胞
- 小鼠骨髓淋巴母细胞;32D clone3
- 恒远生物致力于建设国内最大、种类最全的细胞与微生物标准制品资源库，为大学、科研机构及生物医药研发企业提供高质量、可回溯、品控可靠的生物制品。主要包括原代细胞及通用细胞株、细胞培养周边试剂、微生物标准品等产品的开发、生产、储存和销售。欢迎来电咨询！
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细胞名称
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32D clone3小鼠骨髓淋巴母细胞
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细胞别称
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32D clone3
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商品货号
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HYCC20119
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种属来源
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小鼠
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组织来源
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骨髓
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生长特性
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半贴半悬
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细胞形态
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淋巴母细胞样
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细胞规格
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1×10^6cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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支原体检测
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无
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培养基
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RPMI1640+10%FBS+1ng/mlIL3+1%Anti-Anti
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培养条件
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气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
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冻存条件
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无血清冻存液，液氮储存
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倍增时间
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~24-30小时
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常温细胞收货后处理方法
1. 收到细胞后，首先观察培养瓶是否完好，若发现培养瓶有破裂，培养基外溢、浑浊等现象，请及时拍照并与我们联系。
2. 用 75%酒精对培养瓶表面进行消毒处理，将培养瓶置于细胞培养箱中静置培养 2~4 h，以恢复细胞状态。
3. 静置完成后，取出培养瓶，显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）前三天照片为重要售后依据。如发现细胞异常请及时与我们联系，如果细胞签收三天内未与我们联系，则默认为收货良好。
4. 若细胞密度超过 80%，则可以根据提供的细胞培养步骤进行传代或冻存；若细胞密度未达到80%，收集瓶中完全培养基，留 6mL 培养基，放入细胞培养箱中继续培养。
细胞培养操作
1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜）。第三天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
a) 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b) 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min（视细胞消化情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。
c) 轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d) 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
贴壁细胞传代注意点：
l 一定要PBS洗一遍。
l 细胞多观察几次掌握时间，不要在细胞没有基本脱落就终止消化然后吹打下来，这样细胞 更容易分化和死亡。
l 不要一直对细胞吹打
3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a) 收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b) 根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度1×10^6~1×10^7/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c) 将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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