细胞培养
一、项目介绍
细胞 (cell)是生物体基本的结构和功能单位，已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，因此，对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。以细胞为研究对象，从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次，研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律颇具意义。
二、样品保存运输（寄送细胞时请下载资料中心样品寄送信息单《细胞送样单》并填写好发送给平台助理）
1、活细胞运输方法
请用如图所示不透气培养瓶培养细胞， 待细胞汇合度达到70% 左右时，灌满新鲜培养基至接近瓶口处，拧紧瓶盖，封口膜进一步封住瓶口。瓶身上做好标记(细胞名称，培养基，日期等)。打包时必需做防震处理。常温寄送。
2、冻存细胞运输方法
一定要保证干冰充足(2-3天寄送时间，8-10kg干冰较充足)，冻存管确保被干冰完全覆盖。切勿冻融。勿将水冰混入干冰件中。
3、流式样本接收注意事项
①细胞凋亡
需要活细胞(外地样本不接)。如果细胞带荧光，一定要在交接单和培养板上备注，否则按照无荧光处理。如果因此导致检测结果不可用及样本浪费，我方概不负责，也不接受退单。
②细胞周期
周期需要细胞量比较多，6 孔板送样要求汇合度在70%以上，但不能超过90%。外地样品，需用预冷的70% 乙醇固定过夜后（贴壁细胞需要消化后进行固定），离心弃固定液，加1ml PBS重悬，封口膜封好，4℃运输寄到实验室。
③流式JC-1
需要活细胞(外地样本不接)。细胞汇合度高于70%(6 孔板)，多提供2 个空白孔，做阴性和阳性对照。如果细胞带红光或绿光，不能检测。
④流式ROS
需要活细胞(外地样本不接)。细胞汇合度高于70%(6 孔板)，多提供2 个空白孔，做阴性和阳性对照。如果细胞带绿光，不能检测。
⑤细胞表抗
提前确定公司是否有相应流式抗体(组化抗体不可用)，其他抗体需要客户自己提供(外地样本不接)。
⑥流式三标
提前告知样本具体数量和类型(血液或脾脏~)。血样用抗凝管收集(胞内染色至少需要1.5 mL，表抗需要约1 ml)，注意防止凝血，4℃保存运输。血样4℃保存最多只能存放一周，时间越久实验结果越差。取血后，需尽快寄到实验室;取脾脏时尽量将动物带到实验室，直接在实验室取材后开始实验，若不能将动物带到实验室，取材(整个脾脏)后将组织放在含有PBS 的EP 管或离心管中，4℃保存，提细胞必须在取材后6 小时以内完成，注意有些检测指标(Treg,TH1, TH2 等)需无菌提取。外地样本不接。
4、质粒、RNA类、病毒类
质粒载体、miRNA、siRNA等-20℃寄送。
慢病毒：-80℃保存、 充足纯干冰寄送。