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血清出现沉淀的原因及影响


血清中出现沉淀物是一个相对常见的现象,这些沉淀物可能由多种物质构成,包括但不限于纤维蛋白、胆固醇、脂肪酸酯、蛋白质以及磷酸钙等。以下是对血清中出现沉淀问题的详细分析:

一、血清沉淀物的类型及成因

1.纤维蛋白:纤维蛋白是血清中常见的沉淀物之一,尤其是当血清在低温下收集和快速处理时,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍处于溶解状态。然而,当血清经过过滤分装后,这些纤维蛋白原会在瓶中凝结,形成肉眼可见的纤维蛋白沉淀。

2.胆固醇、脂肪酸酯及蛋白质:这些物质在血清中也可能形成沉淀,尤其是在某些特定的条件下。

3.磷酸钙:磷酸钙是另一种常见的血清沉淀物,它通常会使血清出现浑浊的现象,并且在37℃培养时会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。

二、血清沉淀的影响

1.过滤困难:当血清中出现大量的沉淀物时,血清将很难过滤。一般来说,血清在生产后已经经过严格的过滤处理和无菌检测,因此不推荐再次过滤用于细胞培养的血清。

2.污染误判:磷酸钙沉淀往往被误认为是微生物污染,导致研究者可能会进行不必要的无菌试验,从而浪费时间和资源。

三、避免血清沉淀的方法

1.冻结与解冻:在冻结血清时,应随时摇晃均匀,使温度及成分均一,以减少沉积的发作。同时,应避免直接从-20℃直接解冻至37℃,因为温度改变太大容易形成蛋白质凝结而发作沉积。

2.存储条件:勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得污浊,且其中许多较不稳定的成分也会因此受到破坏,从而影响血清的质量。此外,长期存放在2~8℃也可能导致沉淀的增加。

3.热灭活:血清的热灭活过程十分简单,但容易形成沉积物的增多。若非必要,可以无须进行此过程。若有必要进行热灭活,请遵守56℃,30分钟的准则,并且随时摇晃均匀。

综上所述,血清中出现沉淀物是一个复杂的现象,涉及多种物质和条件。为了避免和减少沉淀物的产生,需要采取一系列的措施和方法来确保血清的质量和稳定性。

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