生化试剂盒
- 游离胆固醇(FC)含量试剂盒-可见分光光度法
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恒远生物生化试剂盒应用领域广泛，涉及酶类、氧化应激、铁死亡、肝功能、肾功能、糖酵解、无机盐离子、脂质代谢、植物抗逆性等。检测样本类型丰富，涉及多种体液、组织、细胞、食品、植物、药物、化妆品等。主要的检测仪器为酶标仪，分光光度计和荧光酶标仪。我们将以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高效专业的生化代测服务和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、极具竞争力的价格，所有这些保证了我们向您提供的最专业最优质的服务。
| 中文名称 |
游离胆固醇(FC)含量试剂盒-可见分光光度法 |
| 规格 | 48样 |
| 货号 |
L-742-SH |
| 价格 | ￥180 |
| 样本类型 | 血清，血浆，组织匀浆，细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
| 检测范围 | 详见说明书 |
| 检测方法 |
可见分光光度法 |
| 货期 | 3-5天 |
| 说明书 | 咨询我司业务员获取 |
| 文献 | 咨询我司业务员获取 |
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
FC是构成细胞膜的主要成分，也是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料。FC浓度可作为脂代谢的指标。
测定原理：
FC氧化酶催化FC生成△4-胆甾烯酮和H2O2，过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物，在500nm有吸收峰，其颜色深浅与FC含量成正比。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：异丙醇50mL（自备）；
试剂二：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体100μL×1瓶，4℃保存；
标准品：液体1mL×1支，浓度为0.5 μ mol/mL，4℃保存。
FC的提取：
1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），即FC待测液。
3．血清（浆）样品：直接测定。
测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到500 nm，蒸馏水调零。
2.FC工作液的配制：临用前，吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，FC工作液置于37℃水浴10min。用不完的工作液4℃保存一周。
3. 标准管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC标准液和900μL FC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A标准管。
4. 测定管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC待测液和900μL FC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A测定管。
5、空白管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL 试剂一和900μL FC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A测定管。
注意：
1、 标准管和空白管只需测定一次。
2、若测定管产生白色浑浊，可以将待测液用异丙醇稀释2~5倍后测定，并在最后结果乘以相应倍数。
计算公式：
1. 血清（浆）中FC含量计算：
FC含量（μmol /dL）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）×100mL
=50×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）
C标准液：0.5μmol/mL；100 mL：1dL=100 mL。
2. 组织中FC含量计算：
(1)按样本蛋白浓度计算
FC含量（μmol / mg prot）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr
= 0.5×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
FC含量（μmol / g鲜重）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷W
= 0.5×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷W
C标准液：0.5μmol/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g/mL
3. 细胞、细菌中FC含量计算：
FC含量（μmol /104 cell）= C标准液×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷细菌或细胞（104 cell /L）
=0.5×（A测定管-A空白管）÷（A标准管-A空白管）÷细菌或细胞（104 cell /L）
C标准液：0.5μmol/mL。
最低检出限为1nmol/mL。
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