猪ELISA试剂盒
- 猪产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab) ELISA试剂盒 间接法
- 上海恒远生物从事酶联免疫学10年有余，技术成熟，产品稳定。恒远品牌自主研发ELISA试剂盒，现已涵盖20多个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富，还可以根据实验需求定制检测范围，并且提供实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。
| 中文名称 |
猪产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab)ELISA试剂盒 间接法 |
| 规格 | 96T |
| 货号 |
HB690-Pg |
| 价格 | ￥2600 |
| 种属 | 猪 |
| 样本类型 |
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab)的含量。 |
| 检测范围 | 详见说明书 |
| 灵敏度 | 详见说明书 |
| 反应时间 | 1-2h |
| 样本体积 | 10ul |
| 检测波长 | 450nm |
| 货期 | 3-5天 |
|
特异性 |
本试剂盒特异性识别天然和重组猪产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab)，与其它类似物无明显交叉反应 |
|
存储条件 |
2-8°C , 切勿冻存 |
|
注意事项 |
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断 |
| 说明书 | 请咨询业务员 |
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中猪产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab)水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被微孔中依次加入已知浓度的标准品和未知浓度的待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪产气荚膜梭菌β毒素抗体(CPβ Ab)浓度。
试剂盒组成
|
1 |
30倍浓缩洗涤液 |
20ml×1瓶 |
8 |
标准品S1（160ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
2 |
链霉亲和素-HRP |
6ml×1瓶 |
标准品S2（80ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
标准品S3（40ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
4 |
生物素标记的抗-IgG抗体 |
6ml×1瓶 |
标准品S4（20ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
5 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
标准品S5（10ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
6 |
显色剂B液 |
6ml×1/瓶 |
9 |
说明书 |
1份 |
|
7 |
终止液 |
6ml×1瓶 |
10 |
封板膜 |
2张 |
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中加入50微升样本，盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
3. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复4次，拍干。
5. 加生物素标记的抗-IgG抗体：每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50μl。37℃温育30分钟
6. 洗涤：操作同4。
7. 加链霉亲和素-HRP：每孔加入50μl的链酶亲和素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
8. 洗涤：操作同4。
9. 显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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