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其他种属ELISA试剂盒
- 微生物 联氨脱氢酶(HDH) ELISA试剂盒 活性
- 上海恒远生物从事酶联免疫学10年有余，技术成熟，产品稳定。恒远品牌自主研发ELISA试剂盒，现已涵盖20多个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富，还可以根据实验需求定制检测范围，并且提供实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。
| 中文名 |
微生物 联氨脱氢酶(HDH) ELISA试剂盒 活性 |
| 规格 | 96T |
| 货号 |
HB1887X-QT |
| 价格 | 2000 |
| 种属 | 微生物 |
| 样本类型 | 血清，血浆，组织匀浆，细胞裂解液、细胞培养上清液等 |
| 检测范围 | 详见说明书 |
| 灵敏度 | 详见说明书 |
| 反应时间 | 1-2h |
| 样本体积 | 10ul |
| 检测波长 | 450nm |
| 货期 | 3-5天 |
|
特异性 |
本试剂盒特异性识别天然和重组微生物联氨脱氢酶(HDH) ，与其它类似物无明显交叉反应 |
|
存储条件 |
2-8°C , 切勿冻存 |
|
注意事项 |
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断 |
| 说明书 | 请咨询业务员 |
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中联氨脱氢酶(HDH)水平。用纯化的联氨脱氢酶(HDH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入联氨脱氢酶(HDH)，再与HRP标记的联氨脱氢酶(HDH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的联氨脱氢酶(HDH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中联氨脱氢酶(HDH)活性浓度。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
|
200U/L |
5号标准品 |
150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
|
100U/L |
4号标准品 |
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
|
50U/L |
3号标准品 |
150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
|
25U/L |
2号标准品 |
150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
|
12.5 U/L |
1号标准品 |
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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