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牛ELISA试剂盒

牛呼吸道合胞病毒(BRSV)检测试剂盒(酶联免疫法)
上海恒远生物从事酶联免疫学10年有余,技术成熟,产品稳定。恒远品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且提供实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

牛呼吸道合胞病毒(BRSV)检测试剂盒

(酶联免疫法)

规格: 96T
货号: HY075X-BV

价格 :¥2000


检测原理:

试剂盒采用双抗体夹心法原理:将牛呼吸道合胞病毒(BRSV)捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及对照品中待测物,加入辣根过氧化物酶标记的酶标记检测抗体,结合形成“抗体-抗原-抗体-HRP”免疫复合物,检测过程中游离的成分均被洗去。加入TMB显色液,在过氧化物酶(HRP)的催化作用下,若反应孔中有待测物则显蓝色,加入终止液,在酸的作用下变成黄色。用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样本中的牛呼吸道合胞病毒(BRSV)呈正比,通过公式判定样本阴阳性。

 

2.试剂盒组分:

名 称

Label

组成成分

Kit Components

数量(48T)

Quantity

数量(96T)

Quantity

酶标板

预包被酶标板

8×6条

8×12条

阳性对照

阳性对照

0.5mL

1mL

阴性对照

阴性对照

0.5mL

1mL

酶标记物

HRP标记检测抗体

6mL

12mL

样品稀释液

PBS、BSA等

10mL

15mL

浓缩洗液(20×)

20倍浓缩洗液

15mL

2×15mL

显色剂

TMB、过氧化氢

6mL

12mL

终止液

稀硫酸、抗沉淀剂

3mL

6mL

说明:相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

 

3.实验所需自备仪器耗材:

 酶标仪(450nm波长滤光片)

 精密单道、多道移液器、吸头、加样槽、烧杯、量筒、吸水滤等

蒸馏水或去离子水

自动洗板机(也可手动洗板)

37℃水浴锅或恒温箱

 EP管(用于稀释校准品及样本)

无粉一次性乳胶手套

微孔板振荡器(如有需要)、离心机、旋涡振荡器等辅助设备

用于数据分析的统计拟合软件(Origin,ELISA Calc)等

 

4.样本采集与保存

 血清将收集于血清分离管的全血标本在室温放置0.5-2小时或4过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20-80℃保存,但应避免反复冻融。

血浆EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20-80℃保存,但应避免反复冻融。

细胞提取液:贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g离心5分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每5x105个细胞中加入150-500μL PBS重悬(推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂;若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃,1500×g离心10分钟,取上清检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

细胞上清:收集细胞培养液,1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 组织匀浆液:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残    留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1 g的组织样品对应9 mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行反复冻融或超声破 碎。最后将匀浆液于2-8℃,5000×g离心5-10分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。


5.注意事项:

试剂盒注意事项

本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断。

试验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。

刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

检测使用的酶标仪需要安装能检测450±2 nm波长的滤光片,光密度范围在0-3.5之间。

请勿使用其他批号或其他来源的试剂混合或替代本试剂盒中的试剂。

试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用,严禁混用。

请勿使用过期的试剂。

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