微生物厌氧氨氧化酶（AAO） ELISA试剂盒活性

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其他种属ELISA试剂盒

微生物厌氧氨氧化酶（AAO） ELISA试剂盒活性: 上海恒远生物从事酶联免疫学10年有余，技术成熟，产品稳定。恒远品牌自主研发ELISA试剂盒，现已涵盖20多个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富，还可以根据实验需求定制检测范围，并且提供实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

产品详情相关产品

中文名	微生物厌氧氨氧化酶（AAO） ELISA试剂盒活性
规格	96T
货号	HB2120X-QT
价格	2000
种属	微生物
样本类型	血清，血浆，组织匀浆，细胞裂解液、细胞培养上清液等
检测范围	详见说明书
灵敏度	详见说明书
反应时间	1-2h
样本体积	10ul
检测波长	450nm
货期	3-5天
特异性	本试剂盒特异性识别天然和重组微生物厌氧氨氧化酶（AAO），与其它类似物无明显交叉反应
存储条件	2-8°C , 切勿冻存
注意事项	本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
说明书	请咨询业务员

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中厌氧氨氧化酶（AAO）水平。用纯化的厌氧氨氧化酶（AAO）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入厌氧氨氧化酶（AAO），再与HRP标记的厌氧氨氧化酶（AAO）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的厌氧氨氧化酶（AAO）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中厌氧氨氧化酶（AAO）活性浓度。

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

200U/L	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
100U/L	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
50U/L	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
25U/L	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
12.5U/L	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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