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人ELISA试剂盒

人丙肝病毒 检测试剂盒
上海恒远生物从事酶联免疫学10年有余,技术成熟,产品稳定。恒远品牌自主研发ELISA试剂盒,现已涵盖20多个种属,数千种产品,涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富,还可以根据实验需求定制检测范围,并且提供实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。

人丙肝病毒  检测试剂盒(酶联免疫法)

价格: 2000

货号:HY4484X-Hu


检测原理:

试剂盒采用双抗体夹心法原理:将人丙肝病毒捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及对照品中待测物,加入辣根过氧化物酶标记的酶标记检测抗体,结合形成“抗体-抗原-抗体-HRP”免疫复合物,检测过程中游离的成分均被洗去。加入TMB显色液,在过氧化物酶(HRP)的催化作用下,若反应孔中有待测物则显蓝色,加入终止液,在酸的作用下变成黄色。用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样本中的人丙肝病毒呈正比,通过公式判定样本阴阳性。

试剂盒组分:

名 称

Label

组成成分

Kit Components

数量(48T)

Quantity

数量(96T)

Quantity

酶标板

预包被酶标板

8×6条

8×12条

阳性对照

阳性对照

0.5mL

1mL

阴性对照

阴性对照

0.5mL

1mL

酶标记物

HRP标记检测抗体

6mL

12mL

样品稀释液

PBS、BSA等

10mL

15mL

浓缩洗液(20×)

20倍浓缩洗液

15mL

2×15mL

显色剂

TMB、过氧化氢

6mL

12mL

终止液

稀硫酸、抗沉淀剂

3mL

6mL

说明:相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

试剂准备及储存:

· 试剂盒各组分应储存于2~8℃保存;

· 使用前请确保试剂盒按规定的条件储存,每次实验仅准备所需实验用量的试剂;

· 1×洗液的配制:浓缩洗液(20×)如有晶体析出,需在37℃下加热至晶体全部溶解后使用。用蒸馏水1:20稀释,例如:10mL浓缩洗涤液加入190mL的蒸馏水,混合均匀。配制好的洗液可以在室温保存1周。

7.检测程序:

使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右,也可置于37℃温箱快速回温至室温。

注意:酶标板未恢复室温前,请勿开封。

 

1

编号

合理安排阳性对照孔、阴性对照孔、空白孔、样品孔。

2

稀释

加样

阳性对照孔加入阳性对照100uL,阴性对照孔加入阴性对照100uL。阴阳对照各设置2孔。

样本孔先加入样品稀释液100uL,再加入样本10uL。

空白孔不加样品不加酶,其余操作与样品孔相同。

3

温育

盖上封板膜,在37℃下孵育30分钟

4

洗板

洗板5次,最后一次洗板后倒扣酶标板,在干净的吸水纸上拍去残液。

5

加酶

每孔加入酶标记物100μL。空白孔:不加酶标记物。

6

温育

盖上封板膜,在37℃下孵育30分钟。

7

洗板

洗板5次,最后一次洗板后倒扣酶标板,在干净的吸水纸上拍去残液。

8

显色

每孔加入显色剂100uL,37℃避光显色15分钟。

9

终止

每孔加终止液 50uL。

10

测定

使用酶标仪在450nm检测波长及620-690nm参比波长条件下测定吸光度值,如果没有参比波长则仅选择450nm波长进行检测。

8.检测程序总结:

步骤

试剂

体积

孵育时间

孵育温度

洗涤次数

1

加样

100ul

30分钟

37℃

5次

2

加酶

100ul

30分钟

37℃

5次

3

加显色液

100ul

15分钟

37℃,避光

4

加终止液

50ul

5

加入终止液后5分钟内用酶标仪在 450nm 处测吸光值

 

9. 阳性判断值Cut-Off:

Cut-Off =阴性对照孔平均OD值×2.1(阴性对照孔OD均值小于0.050时,按0.050计算)。

例:阴性对照孔平均OD值为0.100,则Cut-OFF值=0.100×2.1=0.210;

阴性对照孔平均OD值为0.020,则Cut-OFF值=0.050×2.1=0.105。

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